Taq-полімераза – це ДНК-полімераза, отримана з
бактерії aquaticus, які є термофільні за своєю природою, і як такі мають термостабільні полімерази, які залишаються активними при температурах, що перевищують температуру денатурації ДНК, що робить можливим використання ПЛР на зразках ДНК без необхідності додавання нової ДНК …
Taq-полімераза є термостабільним ферментом, виділеним з бактерій Thermus aquaticus, які може витримувати більш високу температуру етапу денатурації та не інактивується. Таким чином, він може додатково виконувати функцію додавання нуклеотидів до зростаючого ланцюга ДНК під час етапу подовження.
920-96o–C – ДНК-полімераза працює лише на одноланцюговій матричній ДНК, тому необхідна відносно висока температура для розриву водневих зв’язків і створення одноланцюгової матричної ДНК. (саме тому ми використовуємо полімеразу Taq, високотемпературну версію ДНК-полімерази).
Етап 1: Денатурація. Реакційну суміш нагрівають до 94-95⁰C протягом 15-30 секунд. Висока температура викликає розрив водневих зв’язків між основами в двох ланцюгах матричної ДНК і розділення двох ланцюгів.
70–75°C Низькотемпературне зв’язування ДНК полімеразою Taq. Дивно, що Taq/Klentaq зв’язує ДНК з високою спорідненістю при низьких температурах до 5°C. Це було несподівано, оскільки було показано, що Taq є каталітично неактивним при кімнатній температурі (4,6). Фермент оптимально каталітично активний при 70–75°C (4,6).');})();(функція(){window.jsl.dh('CUXtZqujHZGDm9cP17nJ-AI__40','
Taq pol має численні дисульфідні зв’язки між амінокислотами цистеїну, які не перемішуються термічно при відносно високій температурі, як-от 90 градусів, тому фермент більш стабільний і не денатурує при такій високій температурі. Зрештою, Taq pol міститься в бактерії Thermus Aquaticus, яка знаходиться в гарячих джерелах.